1 主题内容与适用范围
本标准规定了食品中铅的测定方法。
本标准适用于食品中铅的测定。
石墨炉原子吸收光谱法的最低检出浓度为5μg/kg。火焰原子吸收光谱法的最低检出浓度为0.1mg/kg。比色法的最低检出浓度为0.25mg/kg。
第一篇 石墨炉原子吸收光谱法(第一法)
2 原理
样品经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后吸收283.3nm共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比较定量。
3 试剂
分析过程中全部用水均使用去离子水(电阻率在8×105Ω以上)，所使用的化学试剂均为优级纯以上。
3.1 硝酸。
3.2 过硫酸铵。
3.3 过氧化氢(30%)。
3.4 高氯酸。
3.5 硝酸(1+1)：取50mL硝酸慢慢加入50mL水中。
3.6 硝酸(0.5mol/L)：取3.2mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL。
3.7 硝酸(1mol/L)：取6.4mL硝酸加入50mL水中，稀释至100mL。
3.8 磷酸铵溶液(20g/L)：称取2.0g磷酸铵，以水溶解稀释至100mL。
3.9 混合酸：硝酸十高氯酸(4+1)。取4份硝酸与1份高氯酸混合。
3.10 铅标准储备液：准确称取1.000g金属铅(99.99%)，分次加少量硝酸(1+1)，加热溶解，总量不超过37mL，移入1000mL容量瓶，加水至刻度。混匀。此溶液每毫升含1.0mg铅。
3.11 铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0mL于100mL容量瓶中，加硝酸(0.5mol/L)或硝酸(1mol/L)至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0，20.0，40.0，60.0，80.0ng铅的标准使用液。
4 仪器
所用玻璃仪器均需以硝酸(1+5)浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲冼干净。
4.1 原子吸收分光光度计(附石墨炉及铅空心阴极灯)。
4.2 马弗炉
4.3 干燥恒温箱。
4.4 瓷坩埚。
4.5 压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。
4.6 可调式电热板、可调式电炉。
5 分析步骤
5.1 样品预处理
5.1.1 在采样和制备过程中，应注意不使样品污染。
5.1.2 粮食、豆类去杂物后，磨碎，过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。
5.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。
5.2 样品消解(可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解)
5.2.1 压力消解罐消解法：称取1.00～2.00g样品(干样、含脂肪高的样品＜1.00g，鲜样＜2.0g或按压力消解罐使用说明书称取样品)于聚四氟乙烯内罐，加硝酸2～4mL浸泡过夜。再加过氧化氢(30%)2～3mL(总量不能超过罐容积的1/3)。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120～140℃保持3～4h，在箱内自然冷却至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入(视消化后样品的盐分而定)10～25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白
5.2.2 干法灰化：称取1.00～5.00g(根据铅含量而定)样品于瓷坩埚中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500℃灰化6～8h时，冷却。若个别样品灰化不彻底，则加1mL混合酸在可调式电炉上小火加热，反复多次直到消化完全，放冷，用硝酸(0.5mol/L)将灰分溶解，用滴管将样品消化液洗入或过滤入(视消化后样品的盐分而定)10～25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。
5.2.3 过硫酸铵灰化法：称取1.00～5.00g样品于瓷坩埚中，加2～4mL硝酸浸泡1h以上，先小火炭化，冷却后加2.00～3.00g过硫酸铵盖于上面，继续炭化至不冒烟，转入马弗炉，500℃恒温2h，再升至800℃，保持20min，冷却，加2～3mL硝酸(1.0mol/L)，用滴管将样品消化液洗入或过滤入(视消化后样品的盐分而定)10～25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。
5.2.4 湿式消解法：称取样品1.00～5.00g于三角瓶或高脚烧杯中，放数粒玻璃珠，加10mL混合酸(或再加1～2mL硝酸)，加盖浸泡过夜，加一小漏斗电炉上消解，若变棕黑色，再加混合酸，直至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷用滴管将样品消化液洗入或过滤入(视消化后样品的盐分而定)10～25mL容量瓶中，用水少量多次洗涤三角瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。
5.3 测定
5.3.1 仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。参考条件为波长283.3nm，狭缝0.2～1.0nm，灯电流5～7mA，干燥温度120℃，20s；灰化温度450℃，持续15～20s，原子化温度1700～2300℃，持续4～5s，背景校正为氘灯或塞曼效应。
5.3.2 标准曲线绘制：吸取上面配制的铅标准使用液10.0，20.0，40.0，60.0，80.0μg/mL各10μL，注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线性回归方程。
5.3.3 样品测定：分别吸取样液和试剂空白液各10μL，注入石墨炉，测得其吸光值，代入标准系列的元线性回归方程中求得样液中铅含量。
5.3.4 基体改进剂的使用：对有干扰样品，则注入适量的基体改进剂磷酸铵溶液(20g/L)(一般为小于5μL)消除干扰。绘制铅标准曲线时也要加入与样品测定时等量的基体改进剂磷酸铵溶液。
6 计算
式中：X1——样品中铅含量，μg/kg(μg/L)；
m1——测定样液中铅含量，ng/mL；
m2——空白液中铅含量，ng/mL；
V1——实际进样品消化液体积，mL；
V2——进样总体积，mL；
V3——样品消化液总体积，mL；
m3——样品质量或体积，g或mL。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。
7 允许差
相对相差≤20%。
第二篇 火焰原子吸收光谱法(第二法)
8 原理
样品经处理后，铅离子在一定pH条件下与DDTC形成络合物，经4-甲基戊酮2-萃取分离，导入原子吸收光谱仪中，火焰原子化后，吸收283.3nm共振线，其吸收量与铅含量成正比，与标准系列比较定量。
9 试剂
本实验用水均为去离子水，试剂为分析纯或优级纯。
9.1 硝酸—高氯酸(1+4)。
9.2 硫酸铵溶液(300g/L)：称取30g硫酸铵〔(NH4)2SO4〕，用水溶解并加水至100mL。
9.3 柠檬酸铵溶液(250g/L)：称取25g柠檬酸铵，用水溶解并加水至100mL。
9.4 溴百里酚蓝水溶液(1g/L)。
9.5 二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC)溶液(50g/L)：称取5g二乙基二硫代氨基甲酸钠，用水溶解并加水至100mL。
9.6 氨水(1+1)。
9.7 4—甲基戊酮—2(MIBK)。
9.8 铅标准溶液：操作同3.10和3.11。配制标准使用液为10μg/mL铅。
10 仪器
原子吸收分光光度计附火焰原子化器，其余同4.2，4.3，4.4，4.6。
11 分析步骤
11.1 样品处理 11.1.1 饮品及酒类：取均匀样品10.0～20.0g于烧杯中，酒类应先在水浴上蒸去酒精，于电热板上先蒸发至一定体积后，加入硝酸—高氯酸(4+1)消化完全后，转移、定容于50mL容量瓶中。
11.1.2 包装材料浸泡液可直接吸取测定。
11.1.3 谷类：去除其中杂物及尘土，必要时除去外壳，碾碎，过30目筛，混匀。称取5.0～10.0g，置于50mL瓷坩埚中，小火炭化，然后移入马弗炉中，500℃以下灰化16h后，取出坩埚，放冷后再加少量混合酸，小火加热，不使干涸，必要时再加少许混合酸，如此反复处理，直至残渣中无炭粒，待坩埚稍冷，加10mL盐酸(1+11)，溶解残渣并移入50mL容量瓶中，再用水反复洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀备用。
取与样品相同量的混合酸和盐酸(1+11)，按同一操作方法作试剂空白试验。
11.1.4 蔬菜、瓜果及豆类：取可食部分洗净晾干，充分切碎混匀。称取10.00～20.00g置于瓷坩埚中，加1mL磷酸(1+10)，小火炭化，以下按11.1.3自“然后移入马弗炉中”起，依法操作。
11.1.5 禽、蛋、水产及乳制品：取可食部分充分混匀。称取5.0～10.0g置于瓷坩埚中，小火炭化，以下按11.1.3自“然后移入马弗炉中”起依法操作。
乳类经混匀后，量取50mL，置于瓷坩埚中，加磷酸(1+10)，在水浴上蒸干，再加小火炭化，以下按 11.1.3自“然后移入马弗炉中”起依法操作。
11.2 萃取分离
视样品情况，吸取25～50mL上述制备的样液及试剂空白液，分别置于125mL分液漏斗中，补加水至60mL。加2mL柠檬酸铵溶液，溴百里酚蓝指示剂3～5滴，用氨水(1+1)调PH至溶液由黄变蓝，加硫酸铵溶液10mL，DDTC溶液10mL，摇匀。放置5min左右，加入10.0mL MIBK，剧烈振摇提取1min，静置分层后，弃去水层，将MIBK层放入10mL带塞刻度管中，备用。
分别吸取铅标准使用液0.00，0.25，0.50，1.00，1.50，2.00mL(相当0.0，2.5，5.0，10.0，15.0，20.0μg铅)于125mL分液漏斗中。与样品相同。
11.3 测定
饮品、酒类及包装材料浸泡液可经萃取直接进样测定。
萃取液进样，可适当减小乙炔气的流量。
仪器参考条件
空心阴极灯电流8mA：共振线283.3nm；狭缝0.4nm；空气流量8L/min；燃烧器高度6mm；BCD方式。
12 计算
式中：X2——样品中铅的含量，mg/kg或mg/L；
m4——测定用样品液中铅的质量，μg；
m5——试剂空白液中铅的质量，μg；
m6——样品质量(体积)，g(mL)；
V4——样品处理液的总体积，mL；
V5——测定用样品处理液的总体积，mL。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。
13 允许差
同第7章。
第三篇 二硫腙比色法(第三法)
14 原理
样品经消化后，在pH8.5～9.0时，铅离子与二硫腙生成红色络合物，溶于三氯甲烷。加入柠檬酸铵、氰化钾和盐酸羟胺等，防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较定量。
15 试剂
15.1 氨水(1+1)。
15.2 盐酸(1+1)：量取100mL盐酸，加入100mL水中。
15.3 酚红指示液(1g/L)：称取0.10g酚红，用少量多次乙醇溶解后移入100mL容量瓶中并定容至刻度。
15.4 盐酸羟胺溶液(200g/L)：称取20g盐酸羟胺，加水溶解至50mL，加2滴酚红指示液，加氨水(1+1)，调pH至8.5～9.0(由黄变红，再多加2滴)，用二硫腙—三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷层绿色不变为止，再用三氯甲烷洗二次，弃去三氯甲烷层，水层加盐酸(1+1)呈酸性，加水至100mL。
15.5 柠檬酸铵溶液(200g/L)：称取50g柠檬酸铵，溶于100mL水中，加2滴酚红指示液，加氨水(1+1)，调pH至8.5～9.0，用二硫腙—三氯甲烷溶液提取数次，每次10～20mL，至三氯甲烷层绿色不变为止，弃去三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗二次，每次5mL，弃去三氯甲烷层，加水稀释至250mL。
15.6 氰化钾溶液(100g/L)：称取10.0g氰化钾，用水溶解后稀释至100mL。
15.7 三氯甲烷：不应含氧化物。
15.7.1 检查方法：量取10mL三氯甲烷，加25mL新煮沸过的水，振摇3min，静置分层后，取10mL水液，加数滴碘化钾溶液(150g/L)及淀粉指示液，振摇后应不显蓝色。
15.7.2 处理方法：于三氯甲烷中加入1/10～1/20体积的硫代硫酸钠溶液(200g/L)洗涤，再用水洗后加入少量无水氯化钙脱水后进行蒸馏，弃去最初及最后的1/10馏出液，收集中间馏出液备用。
15.8 淀粉指示液：称取0.5g可溶性淀粉，加5mL水搅匀后，慢慢倒入100mL沸水中，随倒随搅拌，煮沸，放冷备用。临用时配制。
15.9 硝酸(1＋99)：量取1mL硝酸，加入99mL水中。
15.10 二硫腙三氯甲烷溶液(0.5g/L)：保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。
称取0.5g研细的二硫腙，溶于50mL三氯甲烷中，如不全溶，可用滤纸过滤于250mL分液漏斗中，用氨水(1+99)提取三次，每次100mL，将提取液用棉花过滤至500mL分液漏斗中，用盐酸(1+1)
调至酸性，将沉淀出的二硫腙用三氯甲烷提取2～3次，每次20mL，合并三氯甲烷层，用等量水洗涤二次，弃去洗涤液，在50℃水浴上蒸去三氯甲烷。精制的二硫踪置硫酸干燥器中，干燥备用。或将沉淀出的二硫腙用200，200，100mL三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷层为二硫腙溶液。
15.11 二硫腙使用液：吸取1.0mL二硫腙溶液，加三氯甲烷至10mL混匀。用1cm比色杯，以三氯甲烷调节零点，于波长510nm处测吸光度(A)，用式(3)算出配制100mL二硫腙使用液(70%透光率)所需二硫腙溶液的毫升数(V)。
15.12 硝酸—硫酸混合液(4+1)。
15.13 铅标准溶液：精密称取0.1598g硝酸铅，加10mL硝酸(1+99)，全部溶解后，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1.0mg铅。
15.14 铅标准使用液：吸取1.0mL铅标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于10.0μg铅。
16 仪器
所用玻璃仪器均用硝酸(10%～20%)浸泡24h以上，用自来水反复冲洗，最后用水冲洗干净。
16.1 分光光度计。
17 分析步骤
17.1 样品预处理
同5.1的操作。
17.2 样品消化
17.2.1 硝酸—硫酸法：同GB/T 5009.11中5.2。
17.2.2 灰化法
17.2.2.1 粮食及其他含水分少的食品：称取5.00g样品，置于石英或瓷坩埚中，加热至炭化，然后移入马弗炉中，500℃灰化3h，放冷，取出坩埚，加硝酸(1+1)，润湿灰分，用小火蒸干，在500℃灼烧1h，放冷，取出坩埚。加1mL硝酸(1+1)，加热，使灰分溶解，移入50mL容量瓶中，用水洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
17.2.2.2 含水分多的食品或液体样品：称取5.0g或吸取5.00mL样品，置于蒸发皿中，先在水浴上蒸干，再按17.2.2.1自“加热至炭化”起依法操作。
17.3 测定
吸取10.0mL消化后的定容溶液和同量的试剂空白液，分别置于125mL分液漏斗中，各加水至20mL。
吸取0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mL铅标准使用液(相当0，1，2，3，4，5μg铅)，分别置于 125mL分液漏斗中，各加1mL硝酸(15.9)至20mL。
于样品消化液、试剂空白液和铅标准液中各加2mL柠檬酸铵溶液(20g/L)，1mL盐酸羟胺溶液(200g/L)和2滴酚红指示液，用氨水(1十1)调至红色，再各加2mL氰化钾溶液(100g/L)，混匀。各加5.0mL二硫腙使用液，剧烈振摇1min，静置分层后，三氯甲烷层经脱脂棉滤入1cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点于波长510nm处测吸光度，各点减去零管吸收值后，绘制标准曲线或计算一元回归方程，样品与曲线比较。
18 计算
式中，X3——样品中铅的含量，mg/Kg或mg/L；
m7——测定用样品消化液中铅的质量，μg；
m8——试剂空白液中铅的质量，μg；
m9——样品质量(体积)，g(mL)；
V6——样品消化液的总体积，mL；
V7——测定用样品消化液体积，mL。
结果的表述：报告平行测定算术平均值的二位有效数。
19 允许差
相对相差≤10%。
附加说明：
本标准由卫生部卫生监督司提出。
本标准第一法由上海市食品卫生监督检验所、中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所、浙江省医学科学院、北京市卫生防疫站、吉林省食品卫生监督检验所负责起草；第二法由山西省卫生防疫站、湖南 省卫生防疫站负责起草；第三法由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。 |
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