培养室内的接种室(或叫无菌室)应经常保持清洁、干燥，基本上要能呈无菌状态。在生产使用前，为了更有效、更有把握地使生产用菌种不受杂菌污染，能较好地保持原菌种的性能，在生产前就必须对接种室进行彻底灭菌处理和必要的无菌检查，确认达到要求后，才能投入使用。
(一)无菌检查方法
取出已干热灭菌处理的平面培养皿3对，里面装入20—25ml培养细菌用的培养基，然后放入高压灭菌锅中灭菌，灭菌后制成平板培养基，使制成的平板培养基内绝对无菌。随即洗净全身，消毒双手，穿罩好预先灭菌的工作服，进入接种室内，打开培养皿的包装盖，把平面培养皿放置于接种室内暴露5~10分钟，然后取出，严密包盖好，放入37℃的恒温培养箱保温培养24~72小时。培养箱在放入前要进行彻底的灭菌处理，以免影响结果。培养后，取出观察所长出的菌落数，要求每个培养皿内的菌落数不得超过3~5个，若培养皿内菌落超过5个以上，则须重新进行灭菌处理。直至检查合格后，才可在里面接种。另外，在检查时，还可多制备1~2对平板培养皿，让它不放入接种室中暴露，制备好后直接放培养箱内培养，以备检查灭菌程度、操作好坏、培养箱中有无杂菌，对无菌检查效果进行比较，以利校正检查结果。
(二)接种室的日常管理措施
(1)接种室应经常保持洁净、整齐、呈无菌状态，除必须的接种针、酒精灯、少量的消毒剂、试管架等物品外，一律不准把其它无关的东西放在接种室内。
(2)接种室每周应用甲醛一高锰酸钾熏蒸灭菌1-2次，甲醛用量按每m3空间2~6ml计算，高锰酸钾为甲醛用量的一半或以下，每次熏蒸时间不得低于12小时。
(3)进行接种前、后，应开启紫外线灯照射20~40分钟，紫外线灯离被照射物品的距离最好保持在1.2m以内。常用紫外线灯波长为2537A，功率为30W。
(4)进入接种室必须穿戴好预先灭菌备用的工作服、工作帽、口罩，进入前要用流动的水冲洗全身，消毒双手。
(5)接种前必须将待接种的试管、三角瓶等进行外壁消毒后，才可带进接种室内。对于已经装有菌种的，或已经有菌种繁殖过的试管、三角瓶等，不要随意在接种室内打开盖子或拔出棉塞。
(6)使用化学药物或紫外线灯进行接种室灭菌时，必须防止药物中毒和紫外线刺伤眼睛。使用后的紫外线灯和火柴要随手熄灭，以防发生火灾或损坏电器设备。
