酒精生产中常用的察氏合成培养基以及小米试管、米曲汁、麦芽汁、肉膏等培养基的制备如下：
(一)察氏合成培养基的制备
准确称取蔗糖30g、硝酸钠3g、磷酸氢二钾1g、硫酸镁0.5g、硫酸亚铁0.01g、氯化钾0.5g、琼脂20g、蒸馏水1000ml，先用少量的蒸馏水将磷酸氢二钾溶解于烧杯中，用余下的水再把其它药品溶入另一烧杯中，最后把硫酸亚铁溶解在药液中。如果是采用加热溶解，要等两烧杯中的药液冷却后再混合，最后加入琼脂，使琼酯充分溶解。在加入琼脂后要不断地用玻棒搅拌均匀，待琼脂完全溶解后、趁热装入已灭菌的试管中，迅速塞好棉塞，放于试管框内，试管口塞的棉球用隔水纸包好，防止灭菌时水蒸气浸湿棉球。包好后，放入常压灭菌器中，在100℃以上的蒸气中灭菌40—60分钟，灭菌完毕后，立即取出趁热放成斜面，待冷却斜面形成后，再放入37℃恒温箱内保温培养48—72小时，检查有无杂菌生长，确认无菌后，方可接入菌种进行培养。
(二)小米试管培养基的制备
称取小米，用水浸泡24小时，冬天在室温下浸泡，夏天最好放入冰箱中浸泡。然后取出滤干、在小米中加入20—50％的麸皮，并加入110—126%的水，充分混合均匀，置放于具有滤水器的高压锅内隔水蒸煮45—60分钟左右，制成小米饭，取出，待冷却后，再加入0.1%的蛋白胨和2-1％的葡萄糖，混合均匀，再装入已灭菌的试管内，装入量约为试管的1／2—1／3，然后塞好棉塞，棉塞同样用隔水纸包好，再放入灭菌器中，在0.8—1.0Kg／cm2蒸气压下灭菌30—45分钟，灭菌后，冷至室温，再放入冰箱中保藏备用。为了确保制备的小米试管呈无菌状态，每次作好的小米试管应从不同的部位抽出1—3支，放入35—37℃的恒温培养箱内培养3—4天，看是否有杂菌生长，待无杂菌生长时，方可投入接种使用。
(三)米曲汁的制备
称取优质大米(或糯米)若干，用水浸泡6—12小时，每隔2—3小时换水一次，浸泡后用纱布过滤，再放入蒸气加热灭菌器中煮成饭，中间翻动一次，可适当地加水拌匀，再蒸至大米透心而不烂为止。蒸好后取出放入巳先行消毒、灭菌的瓷曲盘中，铺平冷至36—37℃，接入米曲霉菌，约每kg大米可接入1—2g试管的米曲霉菌，然后放入恒温培养箱内用31±1℃的温度培养，约24—36小时菌丝即可布满，孢子也已形成，这就制成了淡黄色的米曲。从培养箱内取出，按1∶3.5—4的比例加入60—65℃的温水，进行62±1℃保温糖化3—4小时，糖化过程中不断进行搅拌，最后用碘液检验，当碘液加入呈无色时，证明巳基本糖化完全。即用纱布进行第一次过滤，在滤液中加入蛋清，约每kg大米加入3—4个鸡蛋的蛋清，再加热煮沸10—20分钟(最好用水蒸气间接加热，以减少米曲中糖分的损失和焦化)，使蛋清充分凝固，再用稠密的细滤布进行第二次过滤，这时所得滤液即为澄清、透明、淡黄色的米曲汁，装入干燥、灭菌的三角瓶中，在80—100℃温度下，灭菌30—40分钟，就可放置于清洁干燥处备用。
(四)米曲汁固体斜面试管(或液体)培养基的制备
上述方法制得的米曲汁，糖度一般约14—16Bx，使用前，要加入一定的蒸馏水将糖度调在12—14Bx，其加水量可按下述公式计算：
加水量=米曲ml数×原糖度Bx／要求糖度Bx－米曲的ml数
若培养基中糖度过高时，渗透压升高，不利于菌体生长繁殖，并容易引起碳源过剩，使已培养成熟的酵母培养基中残留多余的糖分，酵母易衰老和发生变异。但也不宜过低，过低由于营养不足，则菌体生长瘦弱，发酵能力减退。通常培养酵母的培养基糖度在12—14Bx较为适宜。
调好糖度后，准确量取二定数量的米曲汁倒入烧杯中，放在电炉或酒精灯上加热，立即称取1.8—2.0％的琼脂放入烧杯中一同加热，加热时用玻棒不断进行搅拌，待琼脂充分溶解后，趁热用分液漏斗装入试管中，装入时切勿将米曲汁沾在试管口或管壁上部，以防污染杂菌。然后塞好棉塞，放于试管架上，在蒸气灭菌器中灭菌，灭菌完毕后，取出趁热放在试管斜面支架上，使成为斜面试管，斜面的长度大约为试管长的1/2—1/3。冷却后，琼脂凝固就制成了米曲汁固体斜面试管培养基。
米曲汁液体培养基，就是取上述制得的米曲汁，调好糖度后，按一定量装入试管或三角瓶中，灭菌后，就可接种进行培养。
(五)麦芽汁培养基的制备
称取市售麦芽粉或大麦经浸泡、发芽、干燥、粉碎的麦芽粉，按每Kg麦芽粉加入60—65℃温热水3.5—4kg。于55—60℃保温糖化3-4小时，用碘液检查，然后过滤，即得到澄清、透明的麦芽汁，灭菌后方可备用。
麦芽汁固体、液体培养基的制备与米曲汁固体、液体培养基的制备完全相同。
(六）肉膏固体培养基的制备
准确量取蒸馏水100ml，注入烧杯中，再加入2g琼脂，慢慢加热至沸，再称取牛肉膏0.5g、氯化钠0.5g、蛋白胨1g加入烧杯中同时溶化，当完全溶化后，调好pH值到6.8—7.2之间，趁热倒入巳干热灭菌的培养皿中，再放入高压灭菌锅内，在0.5—1.0kg／cm2蒸气压力、温度为120℃左右灭菌30—40分钟，灭菌后，可作为无菌检查用。
上述检查细菌用的培养基，还可用牛肉或马肉汤，按1％的比例加入消化蛋白，按0.5—1％加入氯化钠，按10％加入碳酸钠，再加入l.8％的琼脂，混合溶化后， 装入培养皿内，灭菌后，同样可用作无菌检查。
另外，介绍两个液体曲发酵液的配方：
(1)薯干粉5.2—5.5％，麸皮2—3％，豆饼粉1.2—1.5％，硫酸铵0.16％。另用硫酸调pH至4.2—4.6。
(2)玉米粉10％，玉米浆3％，花生枯3％，调pH至4—5。
