观察细菌形态所用的主要器材有显微镜、酒精灯、载玻片、接种针、擦镜纸、吕氏美蓝染色液、细菌培养液(或取被污染的发酵醪)。其操作方法如下;
(1)取清洁无油的载玻片一块,在玻片中央滴一滴水(如用细菌培养液可不加水),取少量的样液,用水充分混合均匀,制成混浊液,然后涂布成为小片。(取过菌液的接种针,放在酒精火焰上灼烧后,放回原处。)
(2)涂好带菌的载玻片,可在火焰外面烘干固定,迅速杀死菌体,并使菌体固定在载玻片上,以便染色。烘干时只能用微热,使玻片迅速通过火焰上面,立即用手接触载玻片的背面,使其温度下降,检查时以不烫手为宜,如温度太高会影响染色效果。
(3)将上述所涂液进行染色,用吕氏美兰染色液1-2滴,覆盖子载玻片上涂菌处,染色2~3分钟,然后倾去染液,用水沿载玻片一侧轻轻冲去多余的染料,至冲下的水呈无色为止。如染色后的载玻片,在涂有菌液的地方略有显色,则说明涂片均匀,如颜色过深,则说明涂菌过多。
(4)经染色后的载玻片上的菌体,应使涂面干燥后,并擦去周围水迹,才可在显微镜下观察,干燥方法可以用自然风干或用吸水纸在表面轻轻把水吸去,但注意不能摩擦,以免把菌体擦掉。干燥后,先用低倍镜观察,再用高倍镜观察,最后用油镜观察。但必须指出用此染色法,在光学显微镜下观察细菌,只能观察到个体形态和部分结构,其细胞详细构造,则必须在电子显微镜下才能清楚地观察出来。对酒精生产而言,能了解到细菌的个体形态就基本够了。