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微生物絮凝剂是从微生物体或其分泌物提取、纯化而获得的新型水处理剂，具有无机絮凝剂和高分子合成絮凝剂无法比拟的优势。笔者以制酒废水作为替代培养基，既充分利用了废水中的营养物质产生絮凝剂，又能降低废水中的污染物，达到“以废制废”，废水资源化利用的双重目的，从而为降低絮凝剂的合成成本，解决制约微生物絮凝剂发展瓶颈提供新途径。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
试验所用菌株取自于成都某污水处理厂沉淀中的活性污泥，经本实验室分离并保存。
1.2 实验用水
试验中所使用的废水为成都市某酒厂生产过程中所产生的制酒废水，其水质参数为：还原糖20.80g/L，COD浓度为90000mg/L，pH3.6。
1.3废水发酵培养基及斜面培养基
将制酒废水进行适当稀释，按一定的C/N比加入氮源，121℃灭菌30min后制成废水发酵培养基，用于絮凝剂的合成；将废水稀释10倍，按C/N比20：1的发酵培养基成分加入琼脂20g/L，121℃灭菌30min后制成废水斜面培养基，用于菌种保存。
1.4实验方法
1.4.1絮凝剂产生菌培养条件优化
将筛选出的细菌菌株按10%的相对接种量（V/V，菌体浓度：108个/L）分别接种于不同氮源种类、C/N比废水发酵培养基中，在摇床转速为120r/min，培养温度为30℃的条件下培养后取10mL发酵液经离心后测定其上清液的絮凝率。
1.4.2絮凝率测定方法
按照《水的混凝及絮凝杯罐试验方法GB/T 16881—1997》，并根据实际情况作修改。具体为：200mL烧杯中依次加入高岭土悬浊液（1g/L）93mL，1%CaCl2溶液5mL,，絮凝剂2mL，将pH值调至7.0左右，然后将烧杯置于电动搅拌器下，吸取其上清液于分光光度计波长为550nm处测定其吸光度OD550，以等体积的蒸馏水作为对照，以絮凝率（FR）表示絮凝活性。
FR计算公式如下：FR=（A—B）/A×100%
式中，A为对照样上清液550nm处的吸光度；B为絮凝后上清液550nm处的吸光度。
1.4.3 菌株鉴定
在碱性条件下，用表面活性剂SDS将细菌细胞壁破裂，然后用高浓度的NaCl沉淀蛋白质等杂质，经过氯仿抽取进一步去掉蛋白质等杂质，经乙醇沉淀，得到较纯的总DNA，测序结果进行Blastn同源性检索和相似性分析。
2 结果与讨论
2.1 细菌类絮凝剂产生菌培养条件优化
2.1.1 不同氮源对细菌合成絮凝剂的影响
一般有机氮的成本较高，为降低微生物絮凝剂的生产成本，以尿素和硫酸铵作为培养基添加氮源，考察氮源对絮凝活性的影响。
从结果可以看出，无机氮源作为细菌生长和絮凝剂合成的外加氮源，能够促进细菌的生长和絮凝剂的合成。
2.1.2 C/N对细菌合成絮凝剂的影响
C/N对比会直接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的积累。将5株细菌类絮凝剂产生菌在碳氮比为5：1—30：1的制酒废水发酵培养基中培养40h后，取样测定其絮凝活性。
5株细菌都在C/N15：1—25：1时有较大的絮凝活性，且能在此范围内基本保持稳定。
2.1.3 发酵时间对细菌合成絮凝剂的影响
微生物成长分适应期、加速期、对数期、减速期、静止期和衰亡期6个时期。这5株细菌类絮凝剂产生菌的较大，絮凝活性分别出现在发酵为32h或40h。
2.1.4单株细菌最佳絮凝剂合成条件的确定
由于X15相对于其他4株细菌来说，具有更好的絮凝活性，而且在各次实验中的稳定性较好，故对其进行正交实验。
各因素对X15菌株合成絮凝剂影响程度的顺序为：培养基初始pH>碳氮比>废水COD浓度>氮源种类。从该絮凝剂产生菌的最佳合成条件为：尿素为氮源，培养基初始pH值为8.0，碳氮比为15：1，COD浓度为9000mg/L。
2.2 X15的生理生化特性
X15菌株生理生化指标鉴定结果可以看出，X15革兰氏染色为阳性，能够在厌氧条件下生长，对乳糖反应表现为阴性，其余反应都表现为阳性。
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