1 主题内容与适用范围
本标准规定了果汁、腐乳、酱菜的脱氢乙酸测定方法。
本标准适用于果汁、腐乳、酱菜的脱氢乙酸含量测定。本方法最低检出量果汁为0.0020g/kg，腐乳、酱菜为0.0080g/kg。
2 原理
样品酸化后，脱氢乙酸用乙醚提取浓缩，用附氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量。
3 试剂
除特别注明外，本方法所用试剂均为分析纯试剂，水为蒸馏水。或相应纯度水。
3.1 乙醚：重蒸。
3.2 丙酮：重蒸。
3.3 无水硫酸钠。
3.4 饱和氯化钠溶液。
3.5 10g/L碳酸氢钠溶液。
3.6 10%(V/V)硫酸。
3.7 脱氢乙酸标准溶液：精密称取脱氢乙酸标准品50mg，加丙酮溶于50mL容量瓶中，用丙酮分别稀释至每毫升相当于100，200，300，400，500，800μg脱氢乙酸。
4 仪器
4.1 气相色谱仪：具有氢火焰离子化检测器。
4.2 KD浓缩器。
5 操作方法
5.1 提取
果汁：称取20g事先均匀化的样品于250mL分液漏斗中，加10mL饱和氯化钠溶液，1mL硫酸酸化，摇匀，分别以50，30，30mL乙醚提取三次，每次2min。弃去水层，合并乙醚层于另一250mL分液漏斗中，以10mL饱和氯化钠溶液洗涤一次，弃去水层，用滤纸去除漏斗颈部水分，塞上脱脂棉，加10g无水硫酸钠，室温下放置30min。在KD浓缩器上以50℃浓缩至近干，用吹氮气除去残留溶剂，用丙酮定容后供色谱测定。
腐乳、酱菜：称取5g事先均匀的样品于100mL具塞试管中，加10mL饱和氯化钠溶液，用硫酸调节成酸性，用50、30、30mL乙醚提取三次(腐乳提取时不要剧烈震荡以防乳化)，用吸管转移乙醚于250mL分液漏斗中，用10mL饱和氯化钠溶液洗涤一次，弃去水层，用50、50mL碳酸氢钠溶液提取两次，每次2min。水层转移至另一分液漏斗，用硫酸调节成酸性，加入氯化钠至饱和，用50、30、30mL乙醚提取三次，合并乙醚层于250mL分液漏斗中。用滤纸除去漏斗颈部水分，塞上脱脂棉，加10g无水硫酸钠，室温下放置30min，在KD浓缩器上以50℃水浴浓缩至近干，用吹氮除去残留溶剂，用丙酮定容后供色谱测定。
5.2 色谱条件
5.2.1 色谱柱：玻璃柱，内径3mm，长2.0m内涂5%DEGS＋1%H3PO4固定液的60～80目Chro－mosorb W AW DMCS。
柱温165℃，进样口、检测器温度220℃。
5.2.2 气流条件：氢气 50mL/min；
空气 500mL/min；
氮气 40mL/min。
5.3 测定
进样2μL标准系列中各浓度标准使用液于色谱仪中，测定不同浓度脱氢乙酸的峰高，以浓度为横坐标，峰高为纵坐标绘制标准曲线。同时进样2μL样品溶液，测定峰高与标准曲线比较定量。
5.4 计算
式中：X——样品中脱氢乙酸含量，g/kg；
A——待测样品中脱氢乙酸含量，μg/mL；
V——待测样品定容后体积，mL；
m——样品质量，g。
6 精密度和允许误差
重复测定变异系数＜7%。
二次平行测定相对允许误差的绝对值≤10%，平行测定结果用算术平均值表示，保留二位小数。
附加说明：
本标准由卫生部卫生监督司提出。
本标准由卫生部食品卫生监督检验所、四川省卫生防疫站、北京市卫生防疫站负责起草。
本标准主要起草人王竹天、宋凤英、高鹤娟。
本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。
|
|
