双甲脒[amitraz：N-甲基-双-(2，4-二甲苯亚氨基甲基）胺，商品名Mitac]属中等毒农药，是一种广谱性杀螨剂，用于防治果树、蔬菜等作物上多种害螨，也可用于防治牛、羊等畜牧体外蜱螨。我国1996年6月19日发布的GB 16333—1996《双甲脒等农药在食品中的最大残留限量》规定双甲脒在各类食品中的残留限量为：果菜类蔬菜≤0．5mg/kg，梨果类水果≤0．5mg/kg，柑桔≤0．5mg/kg，棉籽油≤0．05mg/kg。本标准提供检测食品（蔬菜、水果、食用油）中双甲脒残留量的方法。
本标准于1998年4月20日首次发布。
本标准由中华人民共和国卫生部提出。
本标准由东北师范大学分析测试中心、吉林省进出口商品检验局、卫生部食品卫生监督检验所、白求恩医科大学负责起草。
本标准主要起草人：王元鸿、荣会、张莹、胡秀丽、郭伊荇。
本标准由卫生部委托技木归口单位中国预防医学科学院负责解释。
1 范围
本标准规定了食品中双甲脒残留量的测定方法。
本标准适用于蔬菜、水果、食用油等食品中双甲脒(及代谢物)残留量的测定。
2 原理
试样中双甲眯(及代谢物)水解成2，4－二甲基苯胺，正己烷提取，酸、碱反复液－液分配净化。用七氟丁酸肝将2，4－二甲基苯胺衍生成2，4－二甲基苯七氟丁酸胺，用配有电子捕获检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。
3 试剂
除注明外，使用试剂一般为分析纯，水为蒸馏水。
3.1 正己烷：优级纯。
3.2 七氟丁酸酐。
3.3 碳酸氢钠溶液：饱和水溶液。
3.4 氢氧化钠溶液：10mol/L和1.0mo1/L氢氧化钠水溶液。
3.5 盐酸溶液：0.1mo1/L和2.0mo1/L的盐酸水溶液。
3.6 2，4－二甲基苯胺(含量≥98%)标准溶液：用正己烷将2，4－二甲基苯胺标准品配成1.00mg/mL的标准储备溶液，根据需要用正己烷配成适当浓度的标准工作溶液。
3.7 无水硫酸钠：650℃干燥4h，放密闭容器中备用。
3.8 双甲脒标准品：纯度≥99%。
3.9 双甲脒标准溶液：准确称取适量的双甲脒标准品，用正己烷配制成浓度为1.000mg/mL的标准储备液。根据需要再配成适当浓度的标准工作溶液。
4 仪器和设备
4.1 气相色谱仪：配电子捕获检测器。
4.2 组织捣碎机。
4.3 移液管：5mL
4.4 全玻璃回流装置。
4.5 微量进样器：10μL。
4.6 具塞离心管(20mL)，具塞比色管(20mL)，刻度分液漏斗(125mL)。
4.7 恒温水浴。
5 分析步骤
5.1 水解、提取、净化
5.1.1 水果、蔬菜类食品
称取约2.00g(精确至0.01g)捣碎混匀的试样于10mL锥形瓶中，加入5mL盐酸溶液(2.0mol/L)于混匀器上混匀，接好回流装置于120℃回流2h。冷却至室温后，将锥形瓶内的混合物移至20mL具塞离心管中，并用3×1mL蒸馏水冲洗锥形瓶并入离心管中，于混匀器上混匀后加入3mL氢氧化钠溶液(10mol/L)，混匀并冷却后，用3×3mL的正己烷在混匀器上提取3次，每次于3000r/min离心2min，将正己烷相用尖头吸管移入另一20mL的具塞离心管中，然后用3×1mL盐酸溶液(0.1mol/L)在混匀器上提取正己烷3次，每次于3000r/min离心1min。将酸相移入另一20mL离心试管中，再用3×3mL正己烷在混匀器上洗涤酸相，每次于3000r/min离心1min，弃去正己烷相。加入1mL氢氧化钠溶液(1.0mol/L)，混匀，用2×2mL和1mL正己烷在混匀器上提取水相3次，每次于3000r/min离心2min。将正己烷相移入10mL具塞比色管中，并用正己烷定容至5mL。 注：每次提取时间不得少于1.5min。
5.1.2 食用油类
称取20.0g(精确至0.1g)食用油样品置于100mL锥形瓶中，加40mL2.0mol/L盐酸加热回流1h。冷却后移至分液漏斗中，并用少量蒸馏水冲洗锥形瓶并入分液漏斗中，加入20mL正己烷振摇静置分层后弃去油相，向酸相中加入10mL 10.0mol/L氢氧化钠溶液，充分振摇后用2×30mL正己烷草取，合并草取液，用2×10mL 1.0mol/L盐酸萃取，弃去正己烷相。酸相中加入15mL正己烷，并用10.0mol/L氢氧化钠溶液中和至碱性，振摇后分出正己烷相，再用10mL正己烷提取水相一次，合并正己烷相，经无水硫酸钠干燥，将其浓缩后移至10mL具塞比色管中并用正己烷定容至5mL。
5.2 衍生化
于上述正己烷溶液中加入10μL七氟丁酸酐，盖上塞，混匀后，于50℃的恒温水浴中反应1h。冷却至室温，加入3mL饱和碳酸氢钠溶液，混匀1min。分层后取有机相经无水硫酸钠干燥供测定。
5.3 测定
色谱条件，
色谱柱：玻璃柱2.0m×3mm(内径)，填充物为5% SE－30涂于Chromosorb W(80～100目)；
色谱柱温度：135℃；
进样口温度：250℃；
检测器温度：300℃；
载气：氮气(≥99.999%)，30mL/min。
5.4 测定
根据样液中2，4－二甲基苯胺浓度，选定峰高相近的2，4－二甲基苯胺标准工作溶液。标准工作溶液 和样液中七氟丁酸胺的相应值均应在仪器检测线性范围之内。取标准工作溶液5mL按5.2方法进行衍生化。标准工作溶液和样液等体积参插进样。在上述色谱条件下，2，4－二甲基苯七氟丁酰胺的保留时间约为 4.3min.
6 结果
6. 1 计算
用色谱数据处理机或按下式计算试样中双甲脒残留量：
式中：X——试样中双甲脒残留量，mg/Kg；
h——样液中2，4－二甲苯七氟丁酰胺的峰高，mm；
h5——标准工作溶液中2，4－二甲苯七氟丁酸胺的峰高，mm；
c——标准工作溶液中2，4－二甲基苯胺的浓度，μg/mL；
V——样液最终定容的体积，mL；
m——称取试样量，g；
1.21——2，4－二甲基苯胺计算成双甲脒的校正系数。
6.2 最低检出浓度限和回收率
本方法检出限为0.008ng，方法线性范围为0.05～1ng，平均回收率为92.6%；取样量2g时最低检出浓度为0.02mg/Kg，取样20g时最低检出浓度为0.002mg/Kg，相对偏差≤4%。
7 气相色谱参考图
|
|
